0
Существенное генетическое различие между штаммами вируса РРСС представляет собой серьёзное препятствие для развития в широком смысле защитной вакцины. Мы описываем здесь новейший подход к генерации вакцинного штамма вируса РРСС, который мог бы предоставить широкую перекрёстную защиту против неоднородных изолятов вируса РРСС.
Мы первоначально получили набор из 60 достаточных, полных геномных последовательностей вируса РРСС типа II. После этого, мы сформировали консенсус геном (обозначенный как вирус РРСС - CON), совместив 60 полных геномных последовательностей вируса РРСС, а затем выбрали наиболее общий нуклеотид, обнаруженный в каждой позиции соединения. Наш анализ показывает, что вирус РРСС - CON имеет высокую степень идентичности последовательности по отношению к полевым изолятам вируса РРСС при сравнении с любыми существующими вакцинными штаммами вируса РРСС, как на уровне полного генома, так и на уровне отдельных генов. Далее, мы химически синтезировали геном вируса РРСС - CON и собрали его в бактериальную плазмиду под контролем системы экспрессии бактериофага Т7. Полученный в результате клон кДНК вируса РРСС - CON является полностью заразным. Жизнеспособный вирус производится всякий раз после того, как клетки MARC - 145 трансфицируются с РНК-транскриптом, полученным из клона кДНК вируса РРСС - CON. Кроме того, вирус РРСС - CON воспроизводится также эффективно, как и наш прототипный штамм FL12 вируса РРСС, как в искусственно созданных условиях, так и в естественных условиях. Важно отметить, что первичное инфицирование свиней вирусом РРСС - CON даёт значительно более широкую защиту, чем инфицирование прототипным штаммом FL12 вируса РРСС при тестировании с последующим заражением третьим неродственным гетерогенным штаммом вируса РРСС.
В совокупности, наши данные показывают, что вирус РРСС - CON может служить в качестве потенциального кандидата для разработки новейшей вакцины против РРСС с более широкой перекрёстной защитой.
H. Vu, F. Ma, W. Laegreid, A. Pattnaik, F. Osorio. Development of a synthetic porcine reproductive and respiratory syndrome virus strain that confers broader cross-protection. 2014 North American PRRS Symposium.