0
Анализ методом изотермической амплификации с формированием петель (loop-mediated isothermal amplification, LAMP) – это новейший метод, позволяющий быстро амплифицировать ДНК с высокой специфичностью и чувствительностью при изотермических условиях. В настоящем исследовании нами были разработаны LAMP-анализы с шестью праймерами, таргетирующими высококонсервативный район последовательности ITS-1 токсоплазмы гондии (Toxoplasma gondii). Процесс амплификации при изотермических условиях, в водяной бане с температурой 650С, занимал 30 минут, при этом, тесты на специфичность подтверждали отсутствие какой-либо кросс-реактивности с ДНК-матрицами Neospora caninum, Eimeria tenella, Cryptosporidium parvum, Listeria monocytogenes и Streptococcus suis. Предельным значением обнаружения при LAMP-анализе был уровень 0,9 fg геномной ДНК Т. гондии – чувствительность, которая в 10 раз превышает таковую при обычном ПЦР-анализе. Обнаружение геномной ДНК Т. гондии в 118 пробах из диафрагмы свиней со свиноферм в китайской провинции Чжэцзян провели как методом LAMP-, так и ПЦР-анализа. Полученные нами результаты показали, что LAMP-анализ является более чувствительным, чем ПЦР (13,56% против 9,32%).
Xunhui Zhuo, Bin Huang, Jiaqing Luo, Haijie Yu, Baolong Yan, Yi Yang, Aifang Du. Разработка и применение методики изотермической амплификации с формированием петель, основанной на ITS-1, для быстрого обнаружения токсоплазмы гондии в мясе свиней.