Описание фермы
Вспышки респираторного и репродуктивного заболевания произошли в феврале и октябре 2013 года на ферме от опороса до конечной стадии откорма в Варминско - Мазурском воеводстве, Польша. Стадо свиноматок состояло из 400 свиней различных пород. В каждую группу входило приблизительно 55 животных. Поросята были отлучены в возрасте 4 недель и переведены в отдельный инкубатор для доращивания на расстоянии 30 метров. В загонах для опороса и в инкубаторе для доращивания была строго применена система «пусто – занято». Каждые 3 месяца закупалась группа из 40 ремонтных свинок. Их поставляли от независимого поставщика ремонтных свинок, которые свою очередь, не были заражены репродуктивно - респираторным синдромом. Во время карантина ремонтных свинок дважды прививали против гриппа. Участок для откорма, куда переводились свиньи достигшие приблизительно 10-недельного возраста, располагался на расстоянии 8 километров от загонов для свиноматок и инкубатора для доращивания.
Поросята были привиты против пневмонии микоплазмы, актинобациллярной плевропневмонии и цирковируса свиней второго типа. Свиноматки были привиты против парвовируса свиней, рожистых воспалений, кишечной палочки и актинобациллярной плевропневмонии.
Уровень биологической безопасности на ферме был низок. Свиноматки и поросята - отъемыши обслуживались одним и тем же самым штатом. Персонал участка для откорма не допускался на территорию, где проживали свиноматки и поросята - отъемыши. Скотобойня располагалась в 500 метрах от загонов свиноматок.
Репродуктивные и респираторные проблемы со здоровьем
Первое посещение фермы состоялось в феврале 2013 года. В блоках для опороса наблюдалось рождение слабого приплода. У многих поросят была бледная или желтоватая кожа. В некоторых случаях все поросята приплода были мертворожденными или мумифицированными. В инкубаторе для отъемышей были выявлены дыхательные симптомы, одышка, кашель. Вскрытие и лабораторные исследование указали на инфекции, связанные с актинобациллярной плевропневмонии, стрептококкоком, лептоспирой и дизентерией свиней.
У откармливаемого молодняка был зафиксирован хронический кашель, а также наблюдалась одышка. Применение антибиотического лечения не было эффективным. Смертность среди откармливаемого молодняка составляла приблизительно 8 %.
Клинические признаки указали, что предположительно нарушения были связаны с репродуктивно-респираторным синдромом свиней (РРСС). Для проведения иммуноферментного анализа (ИФА) на сероконверсию РРСС были взяты образцы сыворотки крови у поросят, новорожденных 6 и 9-недельного возраста, откармливаемых особей 12, 15, 18 и 21- недельного возраста. От каждой возрастной группы были выбраны 8 животных. Сероконверсия РРСС была обнаружена у животных всех возрастных групп, что стало доказательством заражения стада вирусом (Табл 1.1).
Табл. 1.1. Сведения о серологическом иммуноферментном анализе (ИФА) по исследованию вируса РРСС.
Февраль 2013 | |
Возраст | Положительные образцы/все |
1 неделя | 6/8 |
6 недель | 5/8 |
9 недель | 8/8 |
12 недель | 8/8 |
15 недель | 8/8 |
18 недель | 8/8 |
21 неделя | 8/8 |
Поскольку серологические результаты и клиническое наблюдение указали, что вирус РРСС циркулировал также у свиноматок, было решено провести массовую вакцинацию всех свиноматок аттенюированной живой вакциной против вируса РРСС. Вакцинация производилась только один раз. Помимо этого, за 60 дней до внедрения ремонтных свинок в стадо свиноматок прошла их вакцинация. Приблизительно на 10 день жизни были также привиты и поросята.
Статус здоровья в блоках для опороса и инкубаторе для отъемышей постепенно улучшался в последующие месяцы. Однако в конце апреля 2013 анализ на цепную реакцию полимеразы обнаружил присутствие вируса РРСС у образца абортированного плода. Очевидно, что вирус все еще циркулировал в стаде свиноматок
В июне 2013 вакцинация поросят была остановлена, но продолжалась вакцинная холостых свинок.
14 поросят - отъемышей 7-8 недельного возраста и 6 откармливаемых особей 12 - недельного возраста прошли проверку на антитела РРСС при помощи иммуноферментного анализа в середине сентября 2013 года. ИФА всех поросят младшей группы и большинства откармливаемого молодняка дал отрицательный результат (Табл. 1.2). Только одна откармливаемая особь показала положительный результат. Полученные данные оказались убедительным свидетельством отсутствия в стаде свиноматок и их потомства циркуляции вируса РРСС. Предположительно, вирус не был распространен в инкубаторе для доращивания. Однако наличие единичного положительного результата указало на неполное устранение вируса с фермы.
Табл. 1.2. Сведения о серологическом иммуноферментном анализе (ИФА) по исследованию вируса РРСС.
Февраль 2013 | Сентябрь 2013 | ||
Возраст | Положительные образцы/все | Возраст | Положительные образцы/все |
1 неделя | 6/8 | 7 недель | 0/7 |
6 недель | 5/8 | 8 недель | 0/7 |
9 недель | 8/8 | 12 недель | 1/7 |
12 недель | 8/8 | - | - |
15 недель | 8/8 | - | - |
18 недель | 8/8 | - | - |
21 неделя | 8/8 | - | - |
Новая вспышка респираторных и репродуктивных заболеваний
В конце сентября 2013 г. начался сильный кашель у откармливаемого молодняка. Восемнадцать образцов сыворотки крови, взятых у свиноматок и откармливаемых особей, были проверены на серконверсию вируса гриппа. Носовые мазки кашляющего молодняка были отправлены на ПЦР-диагностику вируса гриппа. Полученные данные были отрицательными
К концу октября 2013 г. серьезный кашель начался в инкубаторах для доращивания. Среди симптомов наблюдались повышение температуры выше 40 ºC и отсутствие аппетита. Через 2-3 дня схожие симптомы проявились у всех животных данной возрастной группы. Лечение больных свиней включало в себя применение жаропонижающих препаратов и доксициклина. Смертность у откармливаемых особей составила приблизительно 3%. Помимо прежних симптомов были зафиксированы случаи болезни Глассера.
Неделю спустя лихорадка и кашель начались у свиноматок, в результате чего умерли две свиноматки и один боров, у трех свиней произошел выкидыш. Если обычно повышенная температура держалась в течение 3 дней, то болезнь свиноматок распространилась на всех животных и продолжалась около 3 недель.
К концу ноября и в декабре 2013 года лихорадка началась также у откармливаемого молодняка, среднее ежедневное увеличение веса которых понизилось с 830 граммов до 760 граммам, а коэффициент конверсии корма увеличился до 3.2. Смертность у откармливаемых особей в этот период составляла приблизительно 5 %.
Табл. 2. Процент мертворожденных и мумифицированных поросят в период между августом 2013 и мартом 2014
08.2013 | 09.2013 | 10.2013 | 11.2013 | 12.2013 | 01.2014 | 02.2014 | 03.2014 | |
Мертворожденные % | 5.5 | 5.43 | 7.38 | 6.33 | 7.0 | 5.37 | 5.63 | 4.68 |
Мумифицированные % | 0.97 | 0.80 | 0.73 | 1.22 | 2.77 | 2.19 | 2.17 | 3.59 |
С появления лихорадки и кашля у свиноматок, произошло ухудшение репродуктивных параметров (Табл 2): процент мертворожденных поросят увеличился с 5.5 % в августе и сентябре, 7.38 % в октябре, 6.33 % в ноябре до 7% в декабре 2013 года; число мумифицированных детенышей увеличилось с менее чем 1% в октябре до 2.77% в декабре. У некоторых поросят наблюдались проблемы с копытами. С февраля 2014 г. начали улучшаться репродуктивные параметры, за исключением процента мумифицированных поросят, и сократилось количество респираторных болезней.
Сходства с проблемами в феврале 2013 года позволили рассматривать вирус РРСС как причину порождения репродуктивных нарушений. В начале февраля 2014 года, 8 образцов сыворотки крови поросят 1, 4 и 7- недельного возраста были направлены на ИФА для определения присутствия в крови антител вируса. Данный анализ позволил обнаружить особые антитела у 6 из 8 самых молодых поросят и у одной свиньи из двух оставшихся возрастных групп (Табл. 1.3), хотя ПЦР - диагностика не выявила присутствие вируса РРСС в исследуемых образцах. Результаты серологического исследования, в свою очередь, продемонстрировали нехватку циркуляции вируса РРСС у свиноматок и поросят - отъемышей.
Позже в феврале 2014 года, при проведении ИФА на антитела вируса РРСС у молодняка 8, 24 - недельных возраста, семь особей показали положительный результат (Табл. 1.3). Было установлено, что среди откармливаемых особей был распространен вирус РРСС, так как они родились после завершения вакцинации поросят аттенюированной живой вакциной.
Табл. 1.3. Сведения о серологическом иммуноферментном анализе (ИФА) по исследованию вируса РРСС.
Февраль 2013 | Сентябрь 2013 | Февраль 2014 | |||
Возраст | Положительные образцы/все | Возраст | Положительные образцы/все | Возраст | Положительные образцы/все |
1 неделя | 6/8 | 7 недель | 0/7 | 1 недель | 6/8 |
6 недель | 5/8 | 8 недель | 0/7 | 4 недели | 1/8 |
9 недель | 8/8 | 12 недель | 1/7 | 7 недель | 1/8 |
12 недель | 8/8 | - | - | 24 недели | 7/8 |
15 недель | 8/8 | - | - | - | - |
18 недель | 8/8 | - | - | - | - |
21 неделя | 8/8 | - | - | - | - |
Кроме того, данные образцы дали положительные результаты при ИФА на наличие в крови антител гриппа. Полученные результаты показали, что вирус гриппа заразил ферму после сентября 2013 года, когда ПЦР - диагностикой и тестом на подавление гемагглютинации были зафиксированы отрицательные результаты.
В начале марта 2014 года у трех поросят, умерших до отлучения от материнской груди, были взяты образцы легких, а также собраны образцы слюны со слизистой оболочки рта из загонов с 7 - недельными поросятами - отъемышами и 10, 13, 16, 19-и 24 - недельным молодняком на откорме. Под исследование попали два загона каждой возрастной группы. Методом ПЦР - диагностики были обнаружены вирус гриппа в образцах легкого у умершего поросенка и в образцах слюны 7, 16 и 19 – недельных свиней (Табл. 3).
Данные образцы слюны, и образцы крови из тех же загонов, где была собрана слюна, подверглись ПЦР - диагностике на наличие вируса РРСС. Присутствие вируса РССС было обнаружено лишь в одном из двух образцах слюны 10 - недельных особей и в сыворотке крови из того же самого загона. ИФА крови, выполненный через 2 недели, у свиней из тех же самых загонов дал только положительные результаты (Табл. 3).
Таблица 3. Сведения ПЦР - диагностики вируса РРСС (в крови и слюне) и гриппа (в легких и слюне) в марте 2014. Образцы крови были объединены (одно кровяное депо для одного загона) для извлечения РНК. ПОЛ – положительный; ОТР – отрицательный. ПОЛ ½ означает, что один из двух образцов был положительным при ПЦР - диагностике
Материал | Поросята |
7 недель |
10 недель |
13 недель | 16 недель | 19 недель | 24 недель | |||||||
грипп | РРСС | грипп | РРСС | грипп | РРСС | грипп | РРСС | грипп | РРСС | грипп | РРСС | грипп | РРСС | |
Легкие | POS 2/3 | NEG | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
Сыворотка крови | - | - | - | NEG | - | POS 1/2 | - | NEG | - | NEG | - | NEG | - | NEG |
Слюна | - | - | POS 2/2 | NEG | POS 2/2 | POS 1/2 | POS 1/2 | NEG | POS1/2 | NEG | POS 1/2 | NEG | NEG | NEG |
Заключительный диагноз
Диагностическое исследование позволило исключить вирус РРСС из числа этиологических агентов, вызвавших респираторное и репродуктивное нарушение у свиней, начавшееся в октябре 2013 года и продлившееся до февраля 2014 года. Ранние вспышки РРСС, диагностированные в феврале 2013 года, были успешно подавлены с помощью единственной массовой аттенюированной живой вакцины, использованной для свиноматок, а также благодаря вакцинации поросят вплоть до июня 2013. Акклиматизация ремонтных свинок была, вероятно, ключом к успеху. Несмотря на очевидное устранение вируса РРСС у свиноматок и в инкубаторе для доращивания, акклиматизация ремонтных свинок была продолжена. Данных мер было недостаточно для устранения вируса РРСС с фермы. Вирус сохранился у откармливаемых молодых особей, где поддерживался непрерывный поток свиней. Примечательно, что более поздний анализ показал, что только одно, более старое из двух зданий для откармливаемого молодняка было заражено. Новое здание, смежное со старым, которое было населено молодняком из инкубатора для доращивания после устранения вируса РРСС, осталось не зараженным.
До возникновения острых клинических симптомов во второй половине сентября 2013 г. ферма не была заражена гриппом. Так, респираторные симптомы данного периода не были связаны с вирусом гриппа. Более поздние результаты доказали присутствие вируса РРСС у откармливаемых особей, что могло служить главным фактором, или по крайней мере одним из факторов, вспышки гриппа в инкубаторе для доращивания в октябре 2013.
В феврале 2014 года, серконверсия вируса гриппа была найдена у откармливаемых особей, и при помощи ПЦР - диагностики был обнаружен вирус в легких у мертвых поросят и в слюне новорожденных и откармливаемых особей. Это доказывает, что вирус гриппа был главной причиной наблюдаемого респираторного и репродуктивного нарушения. Более острая форма болезни у откармливаемого молодняка, чем у других групп животных, могла бы быть вызвана коинфицированием гриппа с вирусом РРСС.
Основываясь на собранных доказательствах, было решено ввести прививку против гриппа свиноматкам за 3 недели до опороса.
Выводы
Вирус гриппа реплицирует в эпителиальных ячейках дыхательных путей и вызывает высокую воспалительную реакцию в легких. У беременных свиней это может вызвать эмбриональную смерть и выкидыш при каждой беременности. Клинический диагноз не всегда является непосредственным методом, рекомендуется брать мазки из носа у свиноматок с повышенной температурой или из легких у мертвых животных. Слюна, собранная со слизистой полости рта выступает хорошим альтернативным материалом в сравнении с сывороткой крови, поскольку с ее помощью возможно одновременно обнаружить присутствие других болезнетворных микроорганизмов в дыхательных путях или окружающей среде. Сбор слюны является более легкой, менее трудоемкой и напряженной процедурой для животных, чем забор крови.
Необычно быстрое устранение вируса РРСС у свиноматок и в инкубаторе для доращивания с использованием ограниченной схемы вакцинации вызывает некоторое удивление, но в свою очередь является вполне актуальным способом улучшения иммунитета стада в борьбе с вирусом РРСС, данный способ помог полностью побороть вирус.
С продолжением увеличения рождения мумифицированных детенышей предположительно связаны неинфекционные факторы.