0
Мониторинг на опоросе
Для определения того, является ли ферма РРСС – положительной, необходимо подтверждение, что рождаемые поросята не являются виремическими. Трансплацентарная передача вируса РРСС является чрезвычайно эффективной, особенно в конце супоросности и поэтому, если виремия присутствует у племенных свиноматок, скорее всего произойдет внутриутробное инфицирование.
Тем не менее, необходимо проводить мониторинг на опоросе. В идеале, поросят нужно тестировать при рождении, но так как это сложно сделать, то тестирование проводится незадолго до отъема. Если результаты отрицательные, отсутствие циркуляции вируса у племенных свиноматок подтверждено. Если положительные – необходимо отобрать образцы при рождении, чтобы определить, рождаются ли поросята инфицированными или инфицируются при перекрестном заражении в период лактации.
Плазма является контрольным образцом для определения наличия вируса. Изначально, анализ крови необходимо отобрать от 30 поросят, это позволит определить 10%-ую распространенность с 95%-ой точностью у различных образцов. При отборе образцов у животных с признаками заболевания, необходимо использовать более чувствительные тесты. В случае очень низкой циркуляции вируса, например, на последних стадиях программы стабилизации или на фермах, которые рассматриваются как клинически стабильные, подобная выборка может быть несущественной, поэтому рекомендуется увеличить количество отбираемых образцов до 60, что позволит определить 5%-ую распространенность заболевания. При низком уровне циркуляции вируса, необходимо проводить систематические и серийные отборы образцов в течение длительного периода времени, так как существует возможность обнаружения положительного образца после нескольких месяцев отрицательных результатов. После обнаружения отрицательных результатов, как минимум необходимо проводить мониторинг поросят в течение всего репродуктивного цикла.
Учитывая сложность отбора образцов крови у маленьких животных, влияние этого на их благополучие и большое количество животных, необходимых для отбора образцов для обнаружения низкой степень распространенности заболевания, были разработаны альтернативные методы отбора образцов. Один вариант – использование производственных жидкостей, выделяемых при кастрации и купировании хвостов. Так как эти жидкости в основном состоят из плазмы и крови, то вирус обычно обнаруживается, если поросята виремичные, поэтому это хороший вариант для увеличения размера образца, сохраняющий надлежащую чувствительность по сравнению с анализом образца сыворотки. Следует отметить, что использование производственных жидкостей подходит только для ферм, где кастрация является обычным делом. Чувствительность при использовании жидкости только от купирования хвостов ниже и недостаточна для определения статуса фермы (Vilalta и др, 2018).
Было доказано, что получение крови из пуповины является надежным вариантом определения вируса РРСС у новорожденных поросят (Martin-Valls и др, 2018). Хотя эти образцы легче получить, их нужно собирать при рождении, также необходимо отметить, что может быть загрязнение от окружающей среды. Тем не менее, это надежная альтернатива, которая обеспечивает легкий мониторинг во время опороса и более предпочтителен по сравнению с использованием жидкости только от купирования хвостов.
Как было определено, ротовые жидкости также являются достоверным образцом. Проблема здесь в том, что подсосным поросятам веревки обычно не интересны, поэтому время отбора образцов занимает длительное время, а репрезентативность помета низкая, что делает этот вариант нецелесообразным. Чтобы попытаться улучшить практичность этого метода, свиноматка может была включена в так называемые семейные жидкости, так как пример свиноматки мотивирует поросят пожевать веревку и увеличивает чувствительность метода. Тем не менее, эта система все еще находится на изучении и не рассматривается как самый хороший метод. Кроме того, обсуждается возможность отбора образцов с поверхности вымени свиноматки с использованием влажных салфеток, так как логично, что если поросята заражены, то они выделят вирус в ротовую жидкость и загрязнят соски. Хотя достаточного опыта в использовании этого метода нет и еще слишком рано оценивать ценность этой системы, результаты обнадеживают, так как они получаются от сбора образцов с поверхностей в помещении опороса. В этом случае, однако, как мы уже упоминали в случае с пуповиной, возможно получение положительных образцов от отрицательного помета, что говорит о вирусных РНК от загрязнения окружающей среды, поэтому важно корректно интерпретировать результаты (Vilalta и др, 2019).
Наконец, изучается возможность использования совокупных образцов с частей туши, особенно языков, для определения наличия или отсутствия вируса у мертворожденных поросят (Baliellas, 2020).
Мониторинг у племенных свиноматок
Другим ключевым моментом является тестирование ремонтных свинок. Оно должно включать в себя отбор образцов до и после карантина на ИФА и ОТ-ПЦР для подтверждения их статуса здоровья, мониторинга эффективности акклиматизации и определения времени заражения, если оно появляется. Такие инструменты как секвенирование необходимо использовать для определения обнаруженных вирусов во время периода акклиматизации (т.е. вакцина или полевой вирус). Хотя этого недостаточно для подтверждения отсутствия риска для фермы со стороны свиноматок, необходимо, по крайней мере, проверять, являются ли они виремическими при переводе на ожидание.
С другой стороны, мониторинг племенных свиноматок чрезвычайно сложен. Серология не имеет большого значения, так как на рынке нет маркерных вакцин, S/P значения очень разнообразны в зависимости от животного и штамма, вызывающего инфекцию (Kim et al, 2007), а животные остаются сероположительными в течение нескольких месяцев. Кроме того, зачастую отсутствует вторичный иммунный ответ и ре-инфицирование, а когда это случается, оно протекает быстро, поэтому парная выборка редко используется для определения рециркуляции вируса. Аналогично, мониторинг с помощью ОТ-ПЦР не практичен, так как количество виремических животных в любое заданное время слишком малое, а виремия у взрослых животных с изначальным иммунитетом – очень короткая. На практике это снижает возможности определения вируса. Основываясь на всем вышеизложенном, мы можем прийти к выводу, что мониторинг свиноматок в производстве используется только на отрицательных фермах и для диагностики вспышек болезни.
Напротив, мониторинг растущих животных достаточно легко проводить и можно использовать почти любой образец и метод. Единственное, что нужно учитывать – размер образцов и система их отбора должны обеспечить надлежащую репрезентативность исследуемого поголовья, основываясь на ожидаемом уровне распространенности заболевания.
