0
Доступные анализы:
Иммунногистохимия (ИГХ)
- Выявляет наличие вирусного антигена
- Тип анализа: ткани
- Преимущества:
- Выявляет вирус в месте поражения (хорошее доказательство причинно-следственной связи)
- Любой положительный результат считается значимый.
- Недостатки:
- Необходимо предоставлять правильные образцы тканей.
- Необходимо большее количество вируса, чем для ПЦР.
- Оценивает только небольшие образцы тканей.
- Скрытые инфекции, скорее всего, будут пропущены, если они не затрагивают тройничный нерв и/или миндалины.
Цепная полимеразная реакция (ПЦР)
- Выявляет наличие определенной последовательности нуклеиновых кислот (ДНК).
- Типы образцов: ткани
- Преимущества:
- Высокая чувствительность
- Количественная оценка ПЦР связана с наличием поражения.
- Средние затраты
-
- Зачастую возможно группирование образцов ткани для снижения затрат при этом потеря чувствительности – минимальная (особенно, что касается клинической зависимости)
- Некоторые ПЦР исследования могут выявлять различия между «диким» вирусом и вакцинным вирусом с удаленным геном.
- Недостатки:
- Для наилучших результатов необходимы образцы тканей (поле смерти)
- Скрытые инфекции, скорее всего, будут пропущены, если они не затрагивают тройничный нерв и/или миндалины.
Твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA)
- Выявляет наличие антител
- Типы образцов: сыворотка
- Преимущества:
- Животные остаются положительными в течение нескольких недель
- Может использоваться в хронических случаях
- Может использоваться для дифференциации контакта с «диким» вирусом и вакцинным вирусом с удаленным геном (см. Таблицу 1).
- Любой положительный результат считается значимый.
- После контакта с «диким» вирусом требуется всего 5-7 дней, чтобы стать серопозитивным.
Таблица 1 помогает продемонстрировать Разницу между вакцинированными и инфицированными некоторых анализов ELISA при использовании вакцины с удаленным геном.
| Реакция нейтрализации вируса | Дифференцированный ELISA направленный на удаленный ген gE/g1 или gB | Интерпретация |
|---|---|---|
| Положительная | Положительная |
Контакт с диким вирусом |
| Положительная | Отрицательная | Вакцинированное животное, не контактировавшее с диким вирусом |
| Отрицательная | Положительная | Ошибка анализа, результат невозможен |
| Отрицательная | Отрицательная | Невакцинированное и неконтактировавшее с диким вирусом |
- Недостатки:
- Необходимо сопоставить анализ с надлежащим удаленным геном в вакцине.
- Становится серопозитивным через 10-14 дней после вакцинации.
Нейтрализация вируса
- Выявляет наличие антител
- Тип образца: сыворотка
- Преимущества:
- Животные остаются серопозитивными в течение нескольких недель
- Можно использовать в хронических случаях
- Более высокая чувствительность, чем у ELISA (может выявлять более низкую концентрацию антител).
- Недостатки:
- Нецелесообразно для большого количества образцов
- Требуется 12 дней, чтобы животные стали серопозитивными.
- Не может дифференцировать между вакциной и «диким» вирусом.
- Надежность в большей степени зависит от технических навыков.
- Скорость реакции зависит от используемого изолята вируса.
Интерпретация результатов:
ИГХ
- Положительный: Вирус присутствует в месте поражения
- Отрицательный: отрицательный результат или уже слишком поздно для выявления вируса
ПЦР
- Положительный: Вирус присутствует. Недавняя вакцинация модифицированным живым вирусом может привести к положительным ПЦР результатам.
- Отрицательный: Отрицательный результат или вирус могли пропустить если тестирование проводилось через длительное время после заражения.
ELISA (таргетированный удаленный ген)
- Положительный: материнские антитела или прошлый контакт (>5-7 дней) с «диким» вирусом.
- Отрицательный: Отрицательный результат или прошло слишком мало времени после заражения «диким» вирусом.
Нейтрализация вируса
- Положительный: Прошлый контакт (> 5-14 дней) с «диким» вирусом или вакциной.
- Отрицательный::
- Отрицательная реакция на вакцину или «дикий» вирус.
- Прошло слишком мало времени для выявления инфекции (<5-7 дней для «дикого» вируса или <10-14 дней для вакцинации).
Сценарии
Свиноматки с абортами
- Соберите 6-8 плодов и объедините образцы для ПЦР теста.
- Свиноматки/свинки, у которых случился аборт: Соберите образцы от свиноматок/свинок, у которых недавно произошел аборт для ПЦР-теста. Можно объединить в группы по 5.
- Индивидуальное тестирование образцов с помощью ELISA может проводиться если прошло >7 дней после аборта.
- Нейтрализация вируса вместо ELISA предпочтительно для поголовья, не вакцинированного от болезни Ауески в силу более высокой диагностической чувствительности исследования.
Отбор ремонтного молодняка из вакцинированного поголовья с известными положительными животными.
- Отберите образцы крови от 100% ремонтных свинок и индивидуально протестируйте образцы с помощью ELISA или Нейтрализации вируса
- Оставьте только животных положительных по нейтрализации вируса или негативных по ELISA (см. Таблицу 1 выше).
Отбор ремонтного молодняка от вакцинированного поголовья с неизвестными положительными животными
- Отберите образцы крови от, по крайней мере, 30 случайно выбранных ремонтных свинок и индивидуально протестируйте с помощью ELISA или Нейтрализации вируса
-
- Если все протестированные образцы положительны по реакции нейтрализации вируса и негативны по ELISA (см. Таблицу 1 выше) вы можете оставить все группу ремонтных животных.
- Если какой-либо образец негативный по реакции нейтрализации вируса, необходимо протестировать 100% оставшихся свинок и оставить только тех, которые были вакцинированы (Реакция на нейтрализацию вируса = положительная).
- Если какая-либо свинка оказывается положительной по ELISA, сделайте повторную оценку целесообразности сохранения животных из этой группы, так как это говорит о том, что поголовье положительно по болезни Ауески.
