0
Доступные анализы
Бактериальная культура
- Изоляция живого организма
- Типы образцов: фекалии, содержимое кишечника
- Преимущества:
-
- Бактерии легко размножаются в течение 1 дня
- Анализ легко провести в любой лаборатории (включая дома)
- Относительно низкая стоимость
- Недостатки:
-
- Некоторые штаммы E. coli являются частью нормальной флоры кишечника
- У свиней одновременно присутствуют множество штаммов E. coli
- У свиней, пролеченных антибиотиками, может предотвращаться размножение бактерий
Чувствительность к антибиотикам
- Тесты in vitro на способность живого организма размножаться при определенных концентрациях различных противомикробных препаратов.
- Типы образцов: фекалии, содержимое кишечника
- Преимущества:
-
- Идентификация чувствительности или резистентности определенных изолятов к распространенным антибактериальным препаратам.
- Идентификация трендов противомикробной резистентности.
- Недостатки:
- Требуется бактериальный изолят.
- Тесты in vitro могут слегка отличаться от результатов in vivo.
- Определенные противомикробные препараты могут не тестироваться или требуют отдельного специального тестирования.
- Средние затраты.
Гистопатология
- Оценивает наличие поражения ткани (повреждение), которое может подтвердить наличие заболевания. Иногда также может выявить непосредственное наличие организма (бактерии и паразиты) или опосредованное (вирус) по средством дополнительного специального окрашивания.
- Типы образцов: ткань.
- Преимущства:
- Связывает бактериальную адгезию с повреждением кишечника
- Отсутствует необходимость специального окрашивания.
- Недостатки:
- Необходимо погрузить ткань кишечника умершей свиньи в формалин в течение 15 минут с момента смерти – ткани кишечника быстро разлагаются.
- Заболеванию могут подвергаться различные сегменты, поэтому требуются различные образцы кишечника.
Генотипирование
- Цепная полимеразная реакция (ПЦР) выявляет наличие определенной последовательности нуклеиновых кислот (ДНК), связанных и известными генами вирулентности.
- Преимущества:
- Проводится с помощью ПЦР, легко в исполнении.
- Помогает идентифицировать патогенность путем выявления наличия генов (не обязательно экспрессии генов), связанной с вирулентными факторами.
-
- Токсичные гены: EAST1, LT, STa, STb, Stx1, Stx2, Stx2e
- Пилусные гены: F18, F41, K88 (F4), K99 (F5), 987P (F6)
- Адгезивные гены: AIDA, EAEA, PAA
- Помогает для правильного выбора вакцины (подбор правильных пилей)
- Позволяет подтвердить, что в изоляте присутствует ген отечной болезни
Гены E. coli, выявленные по средством ПЦР генотипирования и их функции. Гены, выделенные красным являются важными для диагностирования отечной болезни.
| Ген | Тип | Описание |
|---|---|---|
| EAST1 | Токсин | Кишечный токсин, связывается с тем же рецептором и стимулирует тот же секреторный путь, что и Sta (причина диареи точно не установлена) |
| LT | Токсин | Кишечный токсин, который стимулирует кишечную секрецию |
| STa | Токсин | Кишечный токсин, который стимулирует кишечную секрецию в основном у молодых свиней (снижает абсорбцию воды и электролитов) |
| STb | Токсин | Кишечный токсин,который стимулирует секреторную диарею в основном у взрослых свиней (увеличивает секрецию энтероцитов) |
| Stx1 | Токсин | Кишечный токсин, может быть обнаружен в патогенных и непатогенных штаммах. |
| Stx2 | Токсин | Кишечный токсин, может быть обнаружен в патогенных и непатогенных штаммах. |
| Stx2e | Токсин | Системный токсин, вызывающий повреждение сосудов и отек |
| F18 (F107) | Адгезин | Пили (фимбрии), используются для прикрепления, появляется после 20-дневного возраста и обычно связывается с поносом после отъема или отеком |
| F41 | Адгезин | Пили (фимбрии), используются для прикрепления в основном у неонатальных поросят |
| K88 (F4) | Адгезин | Пили (фимбрии), используются для прикрепления в основном у свиней всех возрастов |
| K99 (F5) | Адгезин | Пили (фимбрии), используются для прикрепления в основном у неонатальных поросят |
| 987P (F6) | Адгезин | Пили (фимбрии), используются для прикрепления в основном у неонатальных поросят |
| AIDA | Адгезин | Нефимбриальный "адгезин, вовлеченный в диффузную адгзию", обычно встречается в сочетании с F18 |
| EAE | Адгезин | Нефимбриальный адгезин, принимающий участие в поражениях, связанных с "прикреплние и поражение" |
| PAA | Адгезин | Нефимбриальный адгезин, принимающий участие в поражениях, связанных с "прикреплние и поражение" |
- Недостатки:
- Требуется бактериальный изолят.
- Надейтесь, что генотипизирован правильный изолят (у свиней может быть одновременно несколько изолятов).
- Средняя цена, но обычно тестируется только один изолят.
Интерпретация результатов:
Бактериальная культура:
- Должна быть гемолитическая E. coli
Фото 1. Чистая культура гемолитической E. coli на агаровом диске. Обратите внимание на чистый участок вокруг каждой бактериальной колонии, указывающую на гемолиз (разрушение крови на агаровой пластине). Фото: Университет штата Айова, Лаборатория ветеринарной диагностики, Отдел бактериологии.
- Чистота:
- Чистая культура: наводит на мысль об источнике болезни.
- Смешанная культура: ценность под вопросом
- Количество:
- Большое: наводит на мысль об источнике болезни
- Среднее: различная интерпретация.
- Малое: ценность под вопросом (может быть заражение)
- Отсутствие: Возможно, животное лечили антибиотиками или заражение незначительное.
Чувствительность к антибиотикам
- Чувствительные: возможен большой выбор для лечения, если противомикробный препарат достигает таргет-мишени.
- Устойчивые: выбирайте различные препараты
- МПК: если МПК установлены, убедитесь, что выбранный препарат достигает таргет-органа.
Гистопатология
- Положительная: если наблюдается поражение кишечника с прилипшей к эпителиальным клеткам E. coli
- Отрицательная: Повреждения кишечника отсутствуют
Генотипирование
- Генотипирование необходимо для подтверждения того, что у изолята присутствуют необходимые факторы вирулентности, связанные с отечной болезнью
-
- Должны быть либо F4, либо F18
- Должен быть шигаподобный токсин (Stx2e)
Сценарий
Свиньи после отъема с поносом
- Соберите ректальные мазки от двух или более свиней с поносом, но не проходящих лечение и проверьте на бактериальную культуру, противомикробную резистентность, проведите генотипирование.
- Умертвите 1-3 поросенка с поносом. Незамедлительно отберите и поместите в формалин 3 образца кишечника от каждого поросенка. Соберите свежие образцы кишечника для дальнейшего анализа на бактериальную культуру, противомикробную резистентность и генотипирование.
