Введение
Традиционный мониторинг РРСС в североамериканских племенных стадах состоит из регулярного тестирования образцов сыворотки крови у подсосных поросят. Тем не менее, сбор образцов крови занимает много времени, требует больших затрат, требует работы двух обученных людей со свиньями и может вызвать стресс/смерть свиней. Как результат, многие ветеринары предпочитают ежемесячно делать забот крови у свиней, делая сложным выявления вспышек РРСС на раннем этапе. Мы выдвигаем гипотезу о том, что разработка надежного и практического мониторинга подсосных поросят на основе изучения жидкостей ротовой полости позволит ветеринарам значительно улучшить протоколы эпидемиологического надзора за РРСС путем более частого получения образцов и более широкой выборки животных, что уменьшило бы время выявления вспышек РРСС и/или позволило бы обнаружить вирус при низкой частое заболеваний в стадах, приближающихся к стабильности.
Тестовое диагностирование на основе жидкостей ротовой полости было успешно освоено в отношении выращиваемых свиней и взрослых особей
(хряков и свинок/свиноматок). Однако в специальной литературе наблюдается недостаток информации о получении жидкостей ротовой полости от подсосных поросят.
Целью настоящего отчета является обобщение результатов среди предпринятых усилий определить эффективную и стандартизированную процедуру сбора жидкостей ротовой полости у подсосных поросят.
Методы
Было проведено пять полевых исследований с целью изучения воздействия процедуры отбора образцов ротовой жидкости у семейства (используя для этого хлопковую веревку в отношении свиноматок и поросят) и процедуры отбора образцов ротовой жидкости у помета (используя для этого хлопковую веревку в отношении только поросят) (рисунок 1), ароматизации веревок, времени суток и длины веревки на показатель эффективности получения жидкостей ротовой полости у подсосных поросят (таблица 1).
Таблица 1 – Структура 5 исследований для оценки влияния конкретных факторов на успешность получения жидкостей ротовой полости у подсосных поросят.
Исследование | Цели | Размер выборки |
Исследование 1 | Сравнение процедуры отбора образцов у семейства с процедурой отбора образцов у помета. | 20 свиноматок и соответствующие пометы |
Эффект от подготовки в предыдущий день | 20 свиноматок и соответствующие пометы (день подготовки - контрольный) | |
Эффект от ароматизированных веревок арахисовым маслом | 10 свиноматок и соответствующие пометы | |
Исследование 2 | Эффект от ароматизированных веревок (соевый соус, арахисовое масло, шоколадный сироп, яблочный уксус и сахар) | 10 пометов – используется 5 ароматизированных веревок и одна контрольная веревка в отношении каждого помета |
Исследование 3 | Сравнение процедуры отбора образцов у семейства с процедурой отбора образцов у помета | 25 свиноматок и соответствующие пометы |
Исследование 4 | Сравнение процедуры отбора образцов у семейства с процедурой отбора образцов у помета | 39 свиноматок и соответствующие пометы |
Исследование 5 | Сравнение процедуры отбора образцов у семейства с процедурой отбора образцов у помета | 36 свиноматок и соответствующие пометы |
Для всех исследований был определен показатель эффективности, когда извлекалось не менее 0,5 мл жидкости полости рта из хлопковых веревок. Таким образом, показатель эффективности был представлен как доля успешных сборов ротовой жидкости, деленная на общее количество пометов или свиноматок и пометов, которым предлагались веревки.
Результаты и обсуждение
Исходя из нашего опыта, получение образцов жидкостей ротовой полости у подсосных поросят является не таким простым, как у свиней более старшего возраста. Тем не менее, определились факторы, которые положительно влияли на показатель эффективности получения жидкостей ротовой полости у подсосных поросят (таблица 2).
Таблица 2 – Обобщенные результаты по показателю эффективности получения жидкостей ротовой полости у подсосных поросят в 5 полевых исследованиях
Цель | Исследование 1 | Исследование 2 | Исследование 3 | Исследование 4 | Исследование 5 |
Процедура отбора образцов у помета против процедуры отбора образцов у семейства | |||||
Абсолютный результат (%) | 88 против 100 | 0* | 84 против 88 | 0 против 67 | 14 против 56 |
Контрольная веревка против ароматизированной веревки (%) | 60 против 50 | 0 | - | - | - |
Предыдущее обучение против отсутствия обучения | 75.0% против 55.0% | - | - | - | - |
Возраст поросят (дни) | ~21 | ~ 14 | ~21 | ~14 | ~18 |
Время суток | 6 - 7 утра | 8 - 9 утра | 6 - 7 утра | 8 - 9 утра | 8 - 9 утра |
*Отбор образцов только у помета |
Показатель эффективности отбора образцов у семейства варьировался от 55,56% до 100,00% в исследованиях. Для отбора образцов у помета показатель эффективности варьировался от 0,00% до 88,00%. Когда у свиноматок был доступ к веревкам, с ними также взаимодействовали и поросята, следуя поведению их свиноматки. Когда поросятам предлагали веревки без предварительного обучения, то 30 минут было недостаточно для того, чтобы оставить достаточное количество жидкости на веревках. Интересно, что когда у поросят было предварительное обучение/подготовка, то общий показатель эффективности отбора образцов у помета повышался на 20 процентных пунктов. Это говорит о том, что поросятам либо требуется более взрослое животное, чтобы «научить» их, как взаимодействовать с веревками, либо предыдущее обучение, чтобы иметь более высокий показатель эффективности при сборе ротовой жидкости.
В исследовании 1 мы оценивали арахисовое масло в качестве субстрата на веревках, чтобы сделать «ароматизированные веревки» более привлекательными для поросят. Арахисовое масло немного улучшило успех сбора примерно на 10 процентных пунктов. Однако, пытаясь понять, могли бы другие субстраты на веревках быть более привлекательными, никакие образцы не могли быть извлечены. Существует два возможных объяснения этого: 1) возраст поросят, поскольку он в среднем составлял 14 дней, а по результатам других исследований (обсуждается ниже), у более возрастных поросят показатели эффективности лучше, чем у молодых; и/или 2) ни у этих поросят, ни у их свиноматок не было предварительного обучения.
Как уже обсуждалось ранее, возраст был фактором, который в значительной степени ассоциируется с показателем эффективности отбора образцов. Когда возраст поросят был около 21 дня, у них был лучший показатель эффективности (исследование 1 и 3) по сравнению с исследованиями более молодых поросят (исследования 2, 4 и 5). Одним из возможных объяснений этому является то, что поросята становятся все более любопытными, когда они становятся старше, и поэтому стремятся больше взаимодействовать с окружающей их средой.
Другим фактором, который повлиял на показатель эффективности отбора образцов у помета, было время суток, когда начиналась использоваться веревка. Чем раньше это происходило, тем выше был показатель эффективности (исследование 1 и 3). Казалось, что это происходило благодаря активности поросят. Раньше в тот же день, когда кормились свиноматки, поросята были более склонны взаимодействовать с веревками, в противоположность более позднего времени того же дня, после того как свиноматки получили питание, а поросята были накормлены и становились менее активными или спали. В исследованиях 1 и 3 воздействие веревки на свиней началось в 6 утра, и эти исследования имели более высокий показатель эффективности среди всех исследований. Подробные результаты исследования 1 показаны на рисунке 2.
Кроме того, высота веревки (от пола) также была связана с показателем эффективности получения жидкостей ротовой. Когда веревки были близко от решетчатого пола для опороса, поросята, казалось, больше взаимодействовали с ними, чем когда веревка висела на расстоянии 8-10 см от пола.
Выводы
Для создания постоянного и эффективного мониторинга заболеваний в свиноводстве необходимы практичные, быстрые, легкие, экономичные и надежные методы взятия материала у свиней. Отбор образцов жидкостей ротовой полости обладает такими характеристиками, но это было не легко или удобно, чтобы получать такие образцы у подсосных поросят. Таким образом, мы провели серию полевых исследований, чтобы определить факторы, которые положительно ассоциируются с увеличением показателя эффективности при получении жидкостей ротовой полости у молочных поросят:
- Возраст поросят: поросята, у которых возраст больше 3 недель, имели более высокий показатель эффективности, чем более молодые поросята.
- Время суток: чем раньше была использована веревка, тем выше был показатель эффективности (Лучший ~ 6 утра, плохой ≥ 8 часов утра).
- Субстрат: арахисовое масло немного улучшило показатель эффективности при взятии образов у помета (по сравнению с вариантом без субстрата) (требует дополнительного труда для предварительной пропитки веревок).
- Высота веревки от пола: чем ближе веревка к полу, тем проще для поросят взаимодействовать с ней.
- Процедура отбора образцов у семейства против процедуры отбора образцов у помета: процедура отбора образцов у семейства показала значительно лучшие результаты по сравнению с процедурой отбора образцов у помета (показатель эффективности и объем).
- Предварительное обучение: предварительное обучение улучшило показатель эффективности при отборе образцов у помета.