0
Цирковирус свиней второго типа эндемичен в стадах свиней. Виремия данного вируса, а также его выделение наблюдаются как у новорожденных поросят, так и у взрослых животных. Снижение циркуляции ЦВС-2 представляет собой защитную стратегию, цели которой достигаются как прямыми, так и косвенными профилактическими мерами. Согласно полевым данным, начиная с 1999, отмечаются случаи трансплацетарного заражения цирковирусом свиней второго типа и расстройство репродуктивных функций. Целью данного проекта было, во-первых, определить клинические и патологические последствия заражения ЦВС-2 в процессе осеменения ЦВС2 - меченой стандартных лабораторных животных, серопозитивных к ЦВС-2b. Во - вторых, оценить уровень виремии, выделения вируса и вирусной нагрузки в материнских тканях и тканях плода у стандартных лабораторных свинок (вакцинированных или невакцинированных против ЦВС-2), выращенных на ЦВС2 - положительной ферме и проверяемых во время искусственного осеменения экспериментально зараженной спермой.
Первый эксперимент проводился на 9 свинках, произвольно разделенных на две группы: 6 из них были осеменены спермой, зараженной ЦВС-2, и три – незараженной спермой. У одного из инфицированных животных с самым низким титром антител к ЦВС-2 в начале эксперимента, а также у другого животного, достигшего таких же низких показателей уже во время эксперимента, с течением времени проявилась очевидная сероконверсия. Кроме того, плод этих животных так же оказался ЦВС - положительным. Одна из плацент обнаружила признаки точечного некроза в хориальном эпителии, результаты иммуногистохимического исследования которого на наличие антигена к ЦВС-2 оказались положительными. Полученные результаты предполагают, что серопозитивные к ЦВС-2 свинки могут быть заражены в результате внутриматочного воздействия, низкие титры антител могут повышать вероятность инфицирования плода, повреждение плаценты из-за ЦВС-2 может быть дополнительной причиной повреждения плода при ЦВС-2 инфекции, а заражение ЦВС-2 в период перед осеменением может оказать негативное влияние на эмбрион.
Рис.1. Коагуляционный некроз трофобластов. Гематоксилин - эозиновая окраска
С целью изучения степени защиты, обеспечиваемой вакциной против ЦВС-2, созданной специально для свиноматок, был проведен аналогичный эксперимент, в котором были задействованы 15 свинок с ЦВС2-положительной фермы. Их произвольно распределили по 3 группам. 12 свинок были осеменены зараженной ЦВС-2 спермой, 6 из которых были дважды привиты от ЦВС-2 вакциной для свиноматок: за 5 и 2 недели до осеменения (привитые - инфицированные = ПИ), и 6 не были привиты, но подверглись заражению ЦВС2 - инфицированной спермой во время осеменения (непривитые - инфицированные = НПИ), а 3 оставшихся животных не подверглись ни вакцинации, ни инфицированию зараженной спермой (Контроль = К). Были получены следующие основные результаты: а) большинство НПИ - свинок и К - свинок оказались виремичными по результатам ПЦР на ЦВС-2 перед осеменением, так же как и в различные периоды после осеменения (до 56 недель). В противоположность этому, у привитых-инфицированных животных (ПИ) наблюдалось крайне мало случаев положительных результатов анализа крови на ЦВС-2; б) количество положительных к ЦВС-2 образцов, полученных in vivo, у привитых-инфицированных животных (ПИ) оказалось значительно меньшим, по сравнению с животными их НПИ - и К - групп; в) в ПИ - группе количество положительных к ЦВС-2 плацент по результатам ПЦР было значительно меньше, а положительных к ЦВС-2 плодов не наблюдалось вообще, в отличие от НПИ - и К - групп, в которых было больше ЦВС2-положительных плацент, наряду с ЦВС2-положительнми плодами и 3 положительными результатами анализов околоплодной жидкости в НПИ-группе и одного случая в отношении плода в К - группе; г) в ПИ группе всего несколько образцов показали высокую вирусную нагрузку ≥ 108 ЦВС-2 геномных копий/ml. Уровень антител в ПИ-группе оказался ниже, чем в НПИ - и К - группах. Таким образом, повышение уровня антител, вероятно, может быть не единственным эффектом вакцинации: усиление мукозного иммунного ответа на ЦВС-2 может противодействовать проникновению вируса, и как следствие, его выделению. Кроме того, вероятности заражения плода и околоплодной жидкости при этом снижается.
Рис. 2. Иммуногистохимическое окрашивание антигена ЦВС-2б в коричневый цвет в омертвевших трофобластах. Конрастирование диаминобензидин - хромогеном и гематоксилином.
Данные эксперименты показали, что осеменение свинок спермой, зараженной ЦВС-2, провоцировало заражение плода наряду с заражением плаценты, вакцинация свинок до осеменения зараженной спермой показала явное увеличение вирусной нагрузки у свинок, так же как и значительно меньшее выделение вируса, что было сопоставимо с защитой плода.
