0
Введение
Безопасность корма является серьезной проблемой для стада свиней, и большое внимание необходимо уделить возможному загрязнению сырья и корма грибами и риску выработки микотоксинов. Микотоксины являются вторичными метаболитами, которые вырабатываются мицелиальными грибами. Они развиваются на самых разных сырьевых материалах до, во время и после сбора урожая. Основными микотоксинами, считающимися значимыми с точки зрения здоровья свиней, являются трихотецены, особенно дезоксиниваленол (ДОН), афлатоксины, охратоксины, фумонизины и зеараленон. Этот клинический случай иллюстрирует важность регулярного тестирования сырья на наличие любых микотоксинов для здоровья выращиваемых свиней.
Мы были вызваны в феврале 2016 года в связи с клиническими проблемами у отъемышей в фермерском хозяйстве полного цикла на 350 свиноматок в Бретани. Клиническими признаками были отек век и лба, расстройство координации, одышка и внезапная смерть. Они появились через несколько дней после смены корма. Лабораторная диагностика живых свиней с клиническими признаками подтвердила роль кишечной палочки 0139K82.
Описание фермы и общая обстановка
Ферма расположена в зоне c высокой плотностью размещения свиней, в Бретани (Франция). Подсосных поросят отнимают в возрасте 28 дней и вакцинируют против микоплазмы гиопневмонии и цирковируса свиней второго типа (ЦВС-2).
Масса тела поросят при отъеме составляет в среднем 7,5-8 кг. Поросята питаются промышленным кормом на первом этапе после отъема, до 12-14 кг. После 3-дневного переходного периода по смене корма, поросятам дают корм, произведенный на ферме, до того как их масса тела достигнет 25 кг.
Таблица 1: Пищевой состав корма 2-го этапа, производимого на ферме в феврале 2016 г.
| Пшеница | 40% |
| Ячмень | 30% |
| Обезвоженная мука (соя, рапс) и растительное масло + витаминная и минеральная добавка | 30% |
Клинические признаки появились через несколько дней после смены корма (в возрасте около 40 дней).
Состояние здоровья стада описано ниже:
Таблица 2: Состояние здоровья стада в феврале 2016 г.
|
Микоплазма гиопневмонии Вирус свиного гриппа |
Никаких клинических признаков у отъемышей |
| Вирус РРСС | Положительное стабильное стадо |
| ЦВС-2 | Отъемыши проходят вакцинацию |
Клинический отчет
Рисунок 1: Лабораторный анализ клинических вспышек и календарь вакцинации vaccinations calendar
Часть 1 (февраль – июнь 2016 г.)
Лабораторная диагностика
При посещении стада все больные поросята находились в хорошем состоянии. Клиническими признаками были отек век и лба, расстройство координации, одышка и внезапная смерть.
Данные некропсии
В лаборатории Labofarm® (Группа ветеринарных лабораторий Finalab, Лудеак, Бретань, Франция) были подвержены вскрытию двое живых поросят с клиническими признаками, которые не проходили лечение. Наблюдались признаки отека подкожного слоя лицевой области (фото 1) и век, а также отек брыжейки ободочной кишки (фото 2). Также наблюдались брыжеечные отечные лимфатические узлы и обилие жидкости в перитонеальной полости. Эти поражения, связанные с клиническими признаками, очень напоминают отечную болезнь (ОБ).
Фото 1. Отек подкожного слоя лицевой области
Фото 2. Отек брыжейки ободочной кишки
Бактериология B
Были представлены бактериальные культуры тонкого кишечника, брыжеечных лимфатических узлов, головного мозга и мозговых оболочек, сердечной крови.
Гемолитическая кишечная палочка О139K82 была представлена во всех образцах.
Факторы вирулентности
Для определения специфических пилюсов и токсинных генов, присутствующих в изоляте, применяли генотипирование методом мультиплексной ПЦР:
Таблица 3: Факторы вирулентности выделенного штамма кишечной палочки
| Факторы вирулентности | 0139K82 |
| STa | Отрицательный |
| STb | Отрицательный |
| LTa | Отрицательный |
| Stx2e | Положительный |
| F18 (F107) | Положительный |
| F4 (K88) | Отрицательный |
| Aida | Отрицательный |
В соответствии с клиническими признаками и лабораторной диагностикой поросят-отъемышей отечная болезнь (ОБ) может являться причиной высокой смертности в этом стаде.
Исследования факторов риска
Первым шагом, до того как сформировать стратегии контроля, было изучение факторов риска, предрасполагающих к появлению ОБ у поросят-отъемышей.
Животные: Трипомета смешиваются в загоне. Не было замечено никакой связи с количеством опоросов свиноматок.
Производственные мощности: Управление производственными мощностями было хорошим. Фермер отдает предпочтение системе «все занято – все свободно» с тщательной санитарией. Стрессы, идущие от окружающей среды, находятся на низком уровне (небольшое колебание температуры, правильная вентиляция, хорошие условия содержания).
Качество воды: Бактериологическое и микробное качество питьевой воды было хорошим во время отбора проб. Трубопровод воды очищался каждое утро, и фермер осуществлял регулярный контроль концентрации хлора.
Питание: Фермер начал производство корма второго этапа для поросят-отъемышей за несколько недель до начала эпидемии.
- Раздача: Поросята кормились по желанию. Когда фермер заметил первый признак ОБ, поросята воздерживались от приема пищи не менее 24 часов.
- Пищевой состав корма: Не было обнаружено никаких ошибок в пищевом составе, а также пагубной разницы между 1-м и 2-м этапами питания в плане содержания белков или уровня калорийности.
- Дисперсность состава корма: Замедление прохода корма через кишечник и застой кишечника дают кишечной палочке возможность развиться и время, чтобы размножиться (Плуске и др., 2002) и произвести токсины. В соответствии с этим можно предположить, что большой размер частиц корма может создавать предрасположение к вспышкам ОБ. С другой стороны, слишком «хорошее» измельчение зерна может иметь неблагоприятные последствия для распространения кишечных заболеваний (например, образование язв желудка). Гранулометрия корма, производимого на ферме, должна тестироваться регулярно, результаты в нашем случае представлены в таблице ниже:
Таблица 4: Размер частиц корма 2-го этапа, производимого на ферме для поросят-отъемышей в феврале
| Размер частиц | Критические значения | Корм, производимый на ферме | |
| Источник 1 | Источник 2 | ||
| >3,15 мм | 0% | 0,50% | 0% |
| >2 мм | 25-35 % | 2,00% | 1,80% |
| >1 мм | 25,00 % | 35,80 % | |
| >0,5 мм | 20-40 % | 39 % | 32,00 % |
| >0,3 мм | 10-20 % | ||
| >0,25 мм | 27,00 % | 20 % | |
| <0,25 мм | 10-20 % | 6,50 % | 10 % |
В феврале размер частиц был правильным в соответствии с рекомендациями производителей (источники 1 и 2).
- Микотоксины: Существует несколько различных методов анализа, доступных для диагностики микотоксинов. Во Франции компании, производящие корма, обычно контролируют только уровень дезоксиниваленола (ДОН) с помощью теста при проведении твердофазного иммуноферментного анализа (ТИФА). Этот комплектный тест является быстрым, относительно недорогим. На этой ферме показатели микотоксинов во всех контролируемых ингредиентах (пшеница, ячмень) и в полнорационном корме находились ниже пороговых значений. Сырье и корм должны были иметь низкий уровень риска, связанный с микотоксинами.
Стратегии контроля
Вакцинация: .Мы советуем фермеру проводить вакцинацию для повышения иммунитета поросят. Во Франции для профилактики ОБ, вызываемой кишечной палочкой, была доступна только одна коммерческая инъекционная вакцина. Эта вакцина состояла из генетически модифицированного токсина Stx2e. Она была назначена подсосным поросятам в возрасте 12 дней с конца мая. По словам производителя вакцины, поросята могут быть защищены должным образом в возрасте 40-45 дней при возникновении вспышек заболевания.
Добавка антибиотиков: Для предыдущих партий без вакцинации и для партий, пораженных ОБ, комбинация триметоприма (5 мг / кг массы тела) и сульфамидов (25 мг / кг массы тела) была выбрана в соответствии с чувствительностью штамма кишечной палочки.
Часть 2 (июнь 2016 г. – январь 2017 г.)
В июне появляется определенное число случаев диареи после отъема со смертным исходом. Штаммы кишечной палочки, вызывающие диарею после отъема, были кишечной палочкой K88 Stb. Несмотря на вакцинацию, некоторые случаи ОБ (кишечная палочка O139K82) регулярно диагностировались (лабораторная диагностика в июле и августе), а смертность была выше по сравнению с предыдущими годами и месяцами.
Изменения в стратегиях контроля
Размер частиц корма: Размер частиц снова был проверен в августе 2016 г.:
Таблица 5: Размер частиц корма 2-го этапа, производимого на ферме для поросят-отъемышей в августе
| Размер частиц | Критические значения | Корм, производимый на ферме | |
| Источник 1 | Источник 2 | ||
| >3,15 мм | 0% | 0,50% | 0,20 % |
| >2 мм | 25-35 % | 2,00% | 9,30 % |
| >1 мм | 25,00 % | 48,80 % | |
| >0,5 мм | 20-40 % | 39 % | 24,60 % |
| >0,3 мм | 10-20 % | ||
| >0,25 мм | 27,00 % | 12,10 % | |
| <0,25 м | 10-20 % | 6,50 % | 5 % |
Размер частиц был выше, чем обычно. Обработка была подкорректирована, чтобы получить тот же размер, что и в феврале.
Пищевой состав корма: В октябре пищевой состав корма был изменен. На ферме был произведен корм с высоким содержанием клетчатки. Питательная ценность корма была уменьшена. Уровень содержания белка и усвояемая энергия были снижены за счет увеличения уровня содержания ячменя.
Таблица 6: Пищевой состав корма 2-го этапа, производимого на ферме в феврале 2016 г. и после изменения в октябре 2016 г.
| Состав корма 2-го этапа, производимого на ферме до октября | Состав корма 2-го этапа, производимого на ферме после октября | |
| Пшеница | 40% | 20% |
| Ячмень | 30% | 50% |
| Промышленная кормовая добавка | 30% | 30% |
Вакцинация: В декабре было проведено исследование с живой оральной авирулентной вакциной, содержащей F4-положительный F18-положительный Stx2e-отрицательный штамм. 2 следующие партии были вакцинированы в 21-дневном возрасте. Всем подсосным поросятам была индивидуально перорально введена жидкая форма вакцины. Несмотря на эту новую схему вакцинации, появилась диарея после отъема и ОБ, что было подтверждено лабораторной диагностикой в декабре.
Уровень смертности был выше во втором полугодии, несмотря на улучшение стратегий контроля на ферме.
Часть 3 (январь 2017 г.)
Перед этим неблагоприятным исходом вакцинации и рецидивирующими эпизодами диареи после отъема и ОБ мы решили снова принять во внимание все факторы риска (качество воды, рацион питания, условия содержания) и проанализировать уровни микотоксинов в каждом сырье путем хроматографии в лаборатории Labocea (Плуфраган, Бретань, Франция).
Анализ микотоксинов
В лаборатории Labocea используют комбинацию высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) и масс-спектроскопии для получения количественных результатов. Эта техника используется для текущей диагностики микотоксинов во Франции. Этот метод позволяет обнаруживать более одного вида микотоксинов. Для каждого семейства тест обнаруживает все микотоксины в образце. Результаты для трихоценов в ячмене и пшенице, которые хранятся на ферме, представлены в таблице ниже:
Таблица 7: Концентрация трихотеценов (мг / кг корма при 12% влажности) в пшенице и ячмене в январе 2017 г.
| Микотоксины | Критическое значение | ||
| Сырье | Ячмень | Пшеница | |
| Трихотецены типа А | |||
|
Диацетоксискирпенол (ДАС) |
0 | 0 | |
| 15-моноацетоксискирпенол | 0 | 0 | |
| Токсин T-2 + токсин HT-2 | 0,055 | 0 | |
| Т-2 тетраол | 0,03 | 0 | |
| Т-2 триол | 0 | 0 | |
| Веррукарол | 0 | 0 | |
| Трихотецены типа В | |||
| Дезоксиниваленол | 0,02 | 0,195 | |
| Дезоксинивален-3-глюкозид | 0,01 | 0,015 | |
| Дезоксидиоксиниваленол | 0 | 0 | |
| 15-O- ацетилдиоксиниваленол | 0 | 0 | |
| 3-ацетилдиоксиниваленол | 0 | 0 | |
| Фузаренон Х | 0 | 0 | |
| Ниваленол | 0,015 | 0,02 | |
| Эквивалент ДОН |
0,9 (острая интоксикация) 0,2 (хроническая интоксикация) |
0,955 | 0,31 |
Другие микотоксины отсутствовали или имели незначительное содержание.
Токсичность комбинации микотоксинов не может быть предсказана на основе их индивидуальной токсичности. Исследования влияния микотоксинов проводились с учетом только одного микотоксина, но эффект комбинации микотоксинов может быть антагонистическим, аддитивным или синергичным (Освальд, 2015). В соответствии с этими комбинационными эффектами предложены соответствия, эквивалентные ДОН, с учетом всех тестируемых трихоценов, но, насколько нам известно, нет научного консенсуса относительно предложения стандартизированных уравнений для оценки влияния комбинаций микотоксинов.
В Европе предлагаются рекомендации по критическим значениям для микотоксинов в кормах. Рекомендация Европейской комиссии от 17 августа 2006 г. может быть принята во внимание в отношении ДОН, зеараленона, охратоксина A и фумонизинов. В отношении афлатоксина и маточных рожков доступна Директива 2002/32/EC Европейского парламента.
Мы приняли во внимание, что критическое значение ДОН выше 0,9 мг/кг при 12% влажности (рекомендация Европейской комиссии от 17 августа 2006 г.) для острой интоксикации или выше 0,2 мг / кг при 12% влажности для хронической интоксикации (кормом, принимаемым ежедневно) представляет риск для здоровья свиней.
В нашем случае уровень трихоценов, выраженный в эквиваленте ДОН в пшенице и ячмене, был выше приемлемого уровня в соответствии с используемым уравнением. Даже разбавленный в пищевом составе корма 2-го этапа после отъема, уровень трихоценов был выше критического значения риска, связанного с ежедневным потреблением корма поросятами.
Адаптированные стратегии контроля
В соответствии с этими результатами было принято решение добавить 2000 м.д. продукта, дезактивирующего митоксины, в корма, производимые на ферме (корм 2-го этапа после отъема – ранний / средний / поздний финишерный корм – корм во время беременности и лактации). Все хранилища были очищены и продезинфицированы. Переработка ячменя, пшеницы и кукурузы была изменена. Теперь зерновая пыль, создаваемая при уборке, обработке и хранении, устраняется до измельчения зерен, чтобы снизить риск, связанный с микотоксинами.
На данный момент сохраняется вакцинация против ОБ.
Результаты
После этих изменений улучшилось состояние здоровья стада. Это касается всех возрастов. Показатели смертности снизились у поросят-отъемышей, но также у свиней на доращивании и откорме. Фермер замечает меньше проблем с опоросами и лактацией, а масса тела поросят увеличилась при отъёме. .
Вывод
Необходимо уделять большое внимание возможному загрязнению сырья и корма грибами и риску выработки микотоксинов. Потребление зараженного микотоксинами корма может вызывать острые заболевания, а прием низких доз грибковых токсинов также вызывает поражение в случае повторного воздействия (Брайден, 2012; Мареска и др., 2010). В пределах большой группы токсических воздействий, демонстрируемых микотоксинами, были описаны иммуномодулирующие свойства (Освальд, 2015). Этот эффект повышает восприимчивость к инфекционным заболеваниям: в нашем случае поросята-отъемыши были более склонны к развитию ОД и диареи после отъема. Иммунитет, приобретенный при вакцинации, нарушается приемом микотоксинов. Токсин Т-2 уменьшал вакцинальную реакцию на модельный антиген, овальбумин, соответственно воздействуя на клеточный и гуморальный ответ (Освальд, 2015).
Этот случай иллюстрирует важность регулярных мер в отношении микотоксинов, строгого наблюдения и контроля при самостоятельном фермерском производстве корма. Выбор методов анализа имеет большое значение, и, несмотря на стоимость, рекомендуется полное исследование. Эта процедура, легко доступная в лаборатории Labocea, используется для привычной диагностики микотоксинов во Франции.
