Практическое применение мониторинга РРСС с помощью языков мертворожденных поросят после вспышки

Одной из основных целей после вспышки РРСС на свиноферме является восстановление стабильности с отсутствием вируса РРСС на каждой фазе фермы.

Первым этапом в достижении этой цели является достижение стабильности при опоросе, поскольку при отсутствии вируса РРСС у новорожденных поросят можно предположить, что вирус, вероятно, больше не циркулирует у супоросных свиноматок. Таким образом, эффективность всех действий, предпринятых во время и после вспышки РРСС для снижения передачи и выделения вируса у супоросных свиноматок, может быть оценена на основе динамики обнаружения вируса у поросят при опоросе.

В последние годы был разработан новый метод отбора проб, основанный на концепции совокупных проб, таких как производственные жидкости поросят, описанные Vialalta et al. (2019) и Trevisan et al. (2019). Впоследствии, в соответствии со статьями Baliellas и Machado et al. (2022), использование языков мертворожденных или мертвых свиней на других этапах было признано системой мониторинга, которая дает хорошие результаты.

Мониторинг при опоросе с использованием языков заключается в сборе языков мертворожденных в виде сводной пробы на каждую партию опороса или за заданный период времени. Мы рекомендуем собирать не более 50 языков на совокупный образец и хранить их в замороженном виде до отправки в лабораторию, чтобы получить достаточное количество жидкости на дне мешка во время процесса оттаивания для выполнения метода ПЦР и, следовательно, чтобы избежать необходимости добавлять к образцу жидкую среду, которая может изменить результат из-за эффекта разбавления исходного образца.

Одним из преимуществ сбора языков от мертворожденных поросят в качестве системы мониторинга стабильности при опоросе является то, что вирусная нагрузка положительных ПЦР в течение первых недель после вспышки намного выше (в большинстве случаев Ct между 20-25), чем, например, в производственных жидкостях. Мы можем использовать изменение значений Ct в течение нескольких недель после вспышки, чтобы предсказать, что мы приближаемся к стабильности при опоросе, когда значения Ct имеют тенденцию увеличиваться в сторону отрицательного значения (Ct=>40). Поскольку этот метод обеспечивает более широкий диапазон значений Ct, чем другие образцы, он улучшает нашу способность оценивать тенденцию к стабильности фермы. В целях эффективного использования ресурсов стандартной рекомендацией является не брать образцы языков в первые 10 недель после вспышки, поскольку они, скорее всего, все еще будут высокоположительными с очень низкими значениями Ct.

Например, на этом первом графике мы видим, что, начиная с 20-й недели после вспышки, вирусная нагрузка в каждом пакете с мертворожденными языками снижается, потому что значение Ct положительных результатов ПЦР увеличивается, как и частота отрицательных результатов ПЦР до достижения последовательных отрицательных результатов ПЦР (значения Ct=>40) (рис. 1).​

В этом втором примере (рис. 2) через 30 недель после вспышки все еще нет недель с отрицательными результатами ПЦР (значения Ct => 40), а значение Ct остается низким и постоянным, что указывает на возможную непрерывную рециркуляцию в фазе супоросности. Можно сделать вывод, что меры борьбы оказались недостаточными и необходимо принять дополнительные меры.

В этой ситуации мы рекомендуем собирать языки у мертворожденных поросят, которые родились от свиноматок с первым опоросом отдельно от остальных, чтобы оценить, не является ли причиной сохраняющейся нестабильности инфекция супоросных свиноматок первого опороса, и в этом случае мы обнаружим больше положительных образцов и более высокую вирусную нагрузку в язычках поросят от свиноматок первого опороса.

Наконец, на третьей ферме (рис. 4) динамика делится на два этапа. Между 26 и 38 неделями казалось, что ферма приближается к стабильности из-за увеличения частоты отрицательных результатов ПЦР и низкой вирусной нагрузки в положительных результатах. Примерно на 40-й неделе наблюдается резкое увеличение вирусной нагрузки во всех последующих пробах. Секвенирование этих положительных образцов показало, что на ферму был завезен новый штамм, который, вероятно, стал причиной увеличения вирусной нагрузки в последующих еженедельных результатах образцов.

Мы можем сделать вывод, что мониторинг с помощью языков мертворожденных является неинвазивным, простым и недорогим методом, который при регулярном выполнении позволяет нам предсказать, приближаемся ли мы после нескольких недель отбора проб к стабильности при опоросе.