0
Вирус репродуктивно - респираторного синдрома свиней (РРСС) является одним из наиболее экономически значимых патогенов в свиноводстве.
Одним из возможных путей передачи является искусственное осеменение свиноматок вируссодержащей спермой. Инфекционные выделения в семенной жидкости зависят от различных факторов и трудно предсказуемы. Штамм вируса и его вирулентность играют определенную роль, но также факторы, имеющие отношение к индивидуальному животному, оказывают влияние на наличие и количество вируса в сперме. Вирус РРСС может быть найден в сперме через два дня после заражения, но частота и длительность выделения вируса сильно различаются. У некоторых кабанов вирус РРСС никогда не обнаруживается в сперме или только в течение нескольких дней вскоре после заражения, тогда как у других она может быть обнаружена в течение более длительных периодов времени. В одном исследовании хряк выделял вирус РРСС в сперму вплоть до 92-го дня после заражения (см. таблицу 1). Кроме того, выделение может быть непрерывным или происходить время от времени. Даже если вирус РРСС присутствует в сперме, не каждое осеменение свиноматок является заразным. Это также зависит от различных факторов, таких как количество вируса в сперме, а также минимальная инфекционная доза, которая может варьироваться в зависимости от свиноматки или от штаммов вируса и т.д.
Таблица 1. Избранные исследования, где оценивалась продолжительность и частота выделений вируса РРСС в сперме после экспериментальной инокуляции хряков (ДПИ = дни после инокуляции)
| Исследование | Количество хряков в исследовании | Испытательный интервал | Результаты |
| Свенсон и др., 1994 | 4 | Сперма собиралась со дня 3/5 до 56 ДПИ (интервалы отбора образцов не указаны) | все хряки выделяли вирус; почти все образцы между 3/5 ДПИ и 13/24/27/43 ДПИ положительные |
| Кристофер-Хеннингс и др., 1995а | 4 | Сперма собиралась дважды в неделю в течение 8 недель после экспериментальной инокуляции | все хряки почти непрерывно положительные: 2 хряка между 3 и 35/47 ДПИ, 2 хряка между 5 и 13/25 ДПИ I |
| Кристофер-Хеннингс и др., 1995b | 4 | Сперма собиралась 2 - 3 раза в неделю дольше, чем 100 ДПИ | 2 хряка положительные с перерывами между 3/7 и 25 ДПИ; 2 хряка почти непрерывно положительные от 3 до 56 ДПИ и от 5 до 92 ДПИ |
| Шин и др., 1997 | 3 | Сперма собиралась до 85 ДПИ (интервалы отбора образцов не указаны) | 2 хряка положительные до 50/57 ДПИ; 1 хряк в течение 2 дней |
| Кристофер-Хеннингс и др., 1998 | 6 | Сперма собиралась 3 раза в неделю до 21 ДПИ (5 хряков из 6 были вазэктомированными) | 5 хряков (включая одного не вазэктомированного) непрерывно положительные до 21 ДПИ; 1 хряк до 12 ДПИ |
| Кристофер-Хеннингс и др., 2001 | 7 | Сперма собиралась дважды в неделю вплоть до интервала от 39 и 84 ДПИ (2 Ладраса, 2 Йоркшира, 2 Гэмпшира) |
Порода Ландрас: непрерывно положительные между 4 и 70 ДПИ и от 7 до 32 ДПИ. Порода Йоркшир: один раз или дважды положительны в районе 4/10 ДПИ. Порода Гэмпшир: 1 хряк дважды положительный в районе 10 ДПИ; 2 хряка почти непрерывно положительные между 7 ДПИ и 28/46 ДПИ. |
| Уосилк и др., 2004 | 6 | Сперма собиралась 3 раза в неделю в течение 4 недель, два раза в неделю в течение 2 недель, затем один раз в неделю в течение 6 недель | 1 хряк никогда не был положительным; 4 хряка один раз или дважды положительные в районе 10 ДПИ; 1 хряк несколько раз положительный до 32 ДПИ |
Сознавая эти потенциальные последствия, племенные хозяйства создали отрицательные на вирус хрячники и регулярно проводят мониторинг подвижности вируса РРСС. Это происходит не без проблем. Во-первых, не существует каких-либо стандартов для разработки протоколов мониторинга. Они варьируются от выборки хряков один раз (два раза) в неделю до ежегодного обследования, хотя только очень короткие интервалы между тестами служат средством для обнаружения инфекции на достаточно ранней стадии, чтобы предотвратить дальнейшее распространение в стадах свиноматок (Ровира и др., 2007, Натуес и др., 2013). Другой проблемой представляется метод исследования. Обычно используемый серологический мониторинг несет риск пропуска инфекции на стадии, когда зараженные животные еще не выработали антитела (обычно обнаруживаемые от 7 до 14 дней после инокуляции). Подходящей альтернативой является обнаружение вируса в сыворотке при помощи ПЦР. Так как виремия у взрослых животных обычно длится в течение 10 - 14 дней после заражения, то оптимальная, хотя и дорогостоящая система выборочного контроля будет включать в себя оба метода. Возможный пробел в диагностике (нет больше виремии, но и нет пока обнаруженных антител) должен избегаться путем отбора проб у достаточного количества животных. Наконец, в некоторых хрячниках делают ПЦР спермы, так как она имеет определенные практические преимущества по сравнению с сывороткой (нет необходимости забирать кровь у хряков). Тем не менее, сперма не может считаться надежным средством, чтобы контролировать подвижность вируса РРСС. С одной стороны, обнаружение вируса РРСС в сперме практически является сложной задачей из-за специфических особенностей образца. С другой стороны, вышеупомянутые особенности распространения вируса означают, что отрицательный результат анализа спермы не является доказательством отсутствия инфекции у хряков. Пригодность таких альтернатив, как образцы жидкости ротовой полости, подлежит дальнейшему доказательству.
Поэтому неоднократно возникают не только инфекции хрячников, но и их дальнейшее распространение на стада свиноматок. Одним из ярких примеров, где импорт спермы привел к вспышке вируса РРСС в свободной от него стране, является случай в Швейцарии. В ноябре 2012 года вирус РРСС был обнаружен в трех свиноматочных стадах после того, как они использовали сперму из хрячника в Германии. К счастью, вспышка заболевания в Швейцарии была успешно предупреждена благодаря хорошему сотрудничеству между швейцарскими ветеринарными органами и импортером / хрячником. Тем не менее, это нанесло большой урон, так как было необходимо провести проверку многих потенциальных контактных стад (см. таблицу 2) и ввести в них ограничительные меры, и одно стадо пришлось забить. Даже притом что в хрящнике проводился контроль вируса РРСС (частично через сперму) два раза в неделю, это не помешало тому, чтобы вирус распространился на большое количество свиноматочных стад. Этот пример подчеркивает, что протоколов мониторинга хрячников часто бывает недостаточно для своевременного выявления инфекции, и даже покупка спермы в хрячниках, сертифицированных на отсутствие вируса РРСС, не может гарантировать 100% безопасность для свиноматочных стад.
Таблица 2. Общие диагностические усилия по борьбе со вспышкой вируса РРСС 2012 - 2013 гг. в Швейцарии: количество исследованных швейцарских свиноматочных ферм и проведенных лабораторных исследований (ОТ-кПЦР и ТИФА; подтверждающие исследования: всегда как минимум через 21 дней после первого исследования).
| Швейцарские фермы | Первичные исследования | Подтверждающие исследования | Всего | ||
| ОТ-кПЦР | ТИФА | ТИФА | |||
| Зараженные фермы | Обследованные фермы | 3 | 3 | 2 | 3 |
| Проведенные тесты (положительные) | 1671 (19) | 907 (1) | 105 | 2683 | |
| Фермы, на которые закупалась сперма | Обследованные фермы | 23 | 23 | 23 | 23 |
| Проведенные тесты | 4885 | 4388 | 877 | 10150 | |
| Фермы, имевшие вторичные контакты | Обследованные фермы | 18 | 62 | 3 | 62 |
| Проведенные тесты | 651 | 1850 | 71 | 2572 | |
| Всего | Обследованные фермы | 44 | 88 | 28 | 88 |
| Проведенные тесты | 7207 | 7125 | 1053 | 15385 | |
В результате несколько стран, свободных от вируса РРСС, ввели строгие правила, регулирующие импорт спермы хряков. Некоторые, как Швеция, не импортируют сперму хряков из стран, не свободных от вируса. Швеция, Финляндия и Норвегия имеют официальное соглашение об обмене генетическим материалом (спермой хряков). Норвегия и Новая Зеландия допускают импорт спермы из стран, не свободных от вируса, только при чрезвычайно строгих мерах предосторожности, включая строгие карантинные меры и повторное тестирование доноров спермы и свиноматок-получателей. Швейцарские основополагающие принципы, реализованные после вспышки, требуют тестирования спермы и сыворотки каждого хряка с использованием ПЦР и ТИФА в день каждого сбора спермы для Швейцарии. Результаты должны быть представлены в кантональные ветеринарные службы, а сперма может быть использована только после того, как результаты всех исследований будут отрицательными. Свиноматочные фермы попадают под ограничение в передвижении животных до тех пор, пока выборочное обследование 15 оплодотворенных свиноматок, проведенное как минимум через 28 дней после последнего осеменения импортной спермой, даст отрицательный результат.
