Представление фермы
Настоящее исследование основывается на изучении племенного поголовья коммерческой свинофермы полного цикла в Греции. Производственные возможности фермы определялись 650 производственными свиноматками (коммерческие гибриды большой белой и ландраса) и племенным ядром прародителей из 35 свиноматок, которых держали для производства племенных ремонтных свинок. Свиноматки после отъёма поросят и ремонтные свинки размещались в отдельных загонах в течение 30 - 35 дней, и они дважды искусственно осеменялись свежей спермой от одного и того же хряка. На 30 - 35 сутки беременности свиноматки перемещались в групповые станки (10 животных в группе). Схема вакцинации племенного скота и поросят-отъёмышей на ферме показана в таблице 1. Противопаразитарная профилактическая программа включала однократную инъекцию ивермектина за 14 дней до опороса для свиноматок и два раза в год для кабанов.
Ферма была серопозитивной относительно РРСС, и один год до начала исследования наблюдалась вспышка инфекции вируса РРСС в племенном поголовье и на всех стадиях от опороса до откорма [установлено путём использования полимеразной цепной реакции у племенного скота (30%), поросят-отъёмышей (90%) и молодняка /свиней на откорме (35%)] .
Таблица 1. Схема вакцинации племенного скота и поросят - отъёмышей
Вакцинация против заболеваний | Схема |
Ремонтные свинки | |
Вирус болезни Ауески | в возрасте 90 дней + 120 дней |
Парвовирус + свиная краснуха | в возрасте 150 дней + 180 дней |
Атрофический ринит | в возрасте 150 дней + 180 дней |
Вирус РРСС | в возрасте 180 дней + 210 дней |
Кишечная палочка + палочка газовой гангрены | в возрасте 160 дней + 190 дней |
Свиноматки | |
Вирус болезни Ауески | за 4 недели до опороса |
Парвовирус + свиная краснуха | через 2 недели после опороса |
Атрофический ринит | за 3 недели до опороса |
Вирус РРСС | На 60-й день беременности + на 6-й день лактации |
Кишечная палочка + палочка газовой гангрены | за 2 недели до опороса |
Хряки | |
Вирус болезни Ауески | 3 раза в год |
Парвовирус + свиная краснуха | 3 раза в год |
Атрофический ринит | 3 раза в год |
Поросята | |
Микоплазма гиопневмонии | в возрасте 7 дней + 21 дня |
Цирковирус свиней типа 2 | в день отъёма |
Изучение проблемыy
Полиморфная эритема (ПЭ) была замечена у большинства (90%) племенного поголовья, она была связанна с респираторными проблемами, но без летальности. С января 2014 года до нашего клинического исследования в мае 2014 года у свиноматок, однажды перемещённых в групповые станки (примерно на 30 - 35 день беременности), развилась полиморфная эритема, характеризующаяся участками вздутий кожи красного цвета по всему телу, особенно на шее, лицевой части головы, вокруг глаз и ушей (рисунки 1 - 3). Кроме того, у заражённых свиноматок наблюдалась депрессия, анорексия, высокая лихорадка (40 - 41,5oC) в течение 1 - 3 дней, постуральные трудности и респираторные признаки (умеренное затруднение дыхания, выделения из глаз и носа со слизью и кровью / Рисунки 4 - 5). Вышеуказанные симптомы не были обнаружены у кормящих свиноматок и у тех, у которых недавно забрали поросят, а также в загоне с вновь размещёнными свинками, которые ещё не были оплодотворены. Эти клинические признаки были очевидны, и они сохранялись в течение нескольких недель у большинства (~ 90%) беременных свиноматок после их включения в групповой станок, а также у свиноматок / ремонтных свинок племенного ядра прародителей. Кроме того, у части оплодотворенных свиноматок и свинок от 10 до 15% возобновилась течка вскоре после их размещения в групповых системах (таблица 2).
Таблица 2. Репродуктивные параметры на ферме в 2014 году
Репродуктивные параметры |
Месяцы |
|||||||||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | |
Уровень опороса (%) | 72 | 68.7 | 71.4 | 73.8 | 74.9 | 78.1 | 77.3 | 67.4 | 76.3 | 85.0 | 92.5 | 94.2 |
Прерывание беременности (%) | 1.9 | 2.2 | 2.4 | 2.1 | 2.0 | 1.8 | 1.6 | 1.5 | 1.1 | 0.5 | 0.4 | 0.2 |
Возобновление течки (%) | 26.0 | 29.0 | 26.0 | 24.0 | 23.0 | 20.0 | 21.0 | 31.0 | 22.5 | 14.4 | 7.0 | 5.5 |
Неспособность пороситься (%) | 0.1 | 0.1 | 0.2 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
Количество поросят, рождённых живыми на помёт |
13.2 | 13.2 | 13.1 | 13.2 | 13.2 | 13.1 | 13.3 | 13.1 | 13.2 | 12.9 | 13.1 | 13.1 |
Количество поросят - отъёмышей на свиноматку | 10.7 | 10.9 | 10.8 | 10.8 | 10.9 | 11.0 | 11.1 | 11.1 | 11.2 | 11.4 | 11.6 | 11.8 |
Рисунки 1 - 2. .Больные свиноматки в групповых станках с полиморфной эритемой, характеризующейся участками вздутий кожи красного цвета по всему телу.
Рисунок 3. Больные свиноматки в групповых станках с полиморфной эритемой, характеризующейся участками вздутий кожи красного цвета на шее и лицевой части головы (особенно вокруг глаз и ушей).
Рисунки 4 - 5. Больные свиноматки с полиморфной эритемой, сопровождающейся депрессией, анорексией, лихорадкой, умеренными затруднениями дыхания, выделениями из глаз и носа со слизью и кровью.
Отбор проб и диагностическое обследование
В мае 2014 года были собраны образцы крови от 7 заражённых свиноматок, также как и носовые и вагинальные мазки от других 4 заражённых свиноматок (образцы собирались у свиноматок на 30 - 45 день беременности при наличии опоросов в прошлом от 1 до 5). Кроме того, в августе 2014 года были собраны образцы из носа у 7 заражённых свиноматок.
Образцы сыворотки крови были исследованы путём: а) количественной ПЦР (КПЦР) на вирус РРСС (тип 1 – европейский штамм вируса РРСС и тип 2 – американский штамм вируса РРСС) и на ЦВС типа 2, и б) ИФА на антитела актинобациллярной плевропневмонии, антитела эризипелотрикса рузиопатии, антитела вируса РРСС, антитела вируса алеутской болезни, антитела вируса африканской чумы свиней (АЧС), антитела классической чумы свиней (КЧС) антитела лептоспиры. Носовые мазки были исследованы с помощью ПЦР на наличие актинобациллярной плевропневмонии, бордетеллы бронхисептики, гемофилюс парасуис, пастереллы мультоцида, свиного стрептококка, цитомегаловируса свиней (вирус ЦМВС, вирусные включения ринита) и вируса свиного гриппа (штаммы H1N1, H3N2, H1N2).
Кроме того, были собраны 2 пробы крови (с антикоагулянтом, строгими методами асептики и стерильным оборудованием) от больных свиноматок для анализа культуры клеток крови. Более того, был выполнен гематологический и биохимический анализ образцов крови. На бойне были собраны образцы у 7 больных свиноматок (кожа, печень, почки, лёгкие) для макроскопических и микроскопических исследований.
Помимо этого, были исследованы образцы корма за весь период беременности и лактации на микотоксины [афлатоксины (В1, В2, G1, G2), дезоксиниваленол (ДОН), ацетил-дезоксиниваленол (ацетил-ДОН), ниваленол, зеараленон] с использованием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (диагностическое оборудование «Вариан» 9010/9050).
Лабораторные результаты
Результаты исследований с использованием ИФА и ПЦР образцов сыворотки крови приведены в таблице 3. Все свиноматки были серопозитивными к актинобациллярной плевропневмонии и вирусу РРСС, но серонегативными к вирусу АЧС, вирусу КЧС, вирусу алеутской болезни и роду лептоспир. Кроме того, в отношении вируса РРСС и ЦВС типа 2 никакой виремии обнаружено не было. Результаты носовых мазков представлены в таблице 4. Бордетелла бронхисептика, пастерелла мультоцида и ЦМВС не были обнаружены ни в одной пробе. Свиной стрептококк был обнаружен во всех образцах, один образец (№ 11) был положительным на актинобациллярную плевропневмонию, гемофилюс парасуис и свиной стрептококк. Один образец был положительным на вирус свиного гриппа в пробах в мае 2014 года.
Таблица 3. Результаты анализов образцов сыворотки от семи свиноматок, показывающих поражения кожи и респираторные симптомы
Возбудители заболевания | Исследование | Количество заражённых свиней / Количество обследованных | |
Май 2014 | Август 2014 | ||
Актинобациллярная плевропневмония | ИФА APX-IV | 7/7 | 4/7 |
Свиная краснуха | ИФА | 0/7 | 0/7 |
Вирус африканской чумы свиней | ИФА | 0/7 | 0/7 |
Вирус классической чумы свиней | ИФА | 0/7 | 0/7 |
Цирковирус свиней типа 2 | Количественная ПЦР | 0/7 | 0/7 |
Вирус РРСС* | ИФА | 7/7 | 7/7 |
Вирус РРСС типа 1 (европейский) | ПЦР | 0/7 | 0/7 |
Вирус РРСС типа 2 (американский) | ПЦР | 0/7 | 0/7 |
Вирус болезни Ауески | ИФА антител к ангигену gE вируса** | 0/7 | 0/7 |
Род лептоспир | ИФА | 0/7 | 0/7 |
*Результаты ИФА антител вируса РРСС: < 0,4 отрицательный; 0.4 - 0.99 положительный 1; 1.0 - 1.49 положительный 2; 1.5-1.99 положительный 3; 2.0 - 2.49 положительный 4; 2.5 - 2.99 положительный 5; ≥ 3,0 положительный 6
** Положительный: инфицирование полевым вирусом (антитела к ангигену gE вируса) – отрицательный: нет инфицирования полевым вирусом (нет антитела к ангигену gE вируса).
***Лептоспиры: L. Pomona, L. tarassovi, L. canicola, L. grippothyphosa, L. Bratislava: все образцы были < 1: 100
Таблица 4. Результаты ПЦР - диагностики мазков из носа от больных свиноматок
Количество заражённых свиней / Количество обследованных | Возбудители заболевания | ||||||
Актинобациллярная плевропневмония | Бордетелла бронхисептика | Гемофилюс парасуис | Пастерелла мультоцида | ЦМВС | Свиной стрептококк | Вирус свиного гриппа | |
Май 2014 | 1/4 | 0/4 | 1/4 | 0/4 | 0/4 | 4/4 | 1/4 (штамм H1N1) |
Август 2014 | 1/7 | 0/7 | 6/7 | 0/7 | 0/7 | 7/7 | 0/7 |
Исследование вагинальных мазков выявило инфекцию кишечной палочки и разновидности стрептококков во всех образцах. Разновидности стрептококков и актинобациллы были выделены из культуры крови, в то время как антибиограмма показала, что они были чувствительны к пенициллину, ампициллину и комбинации амоксициллина и клавулановой кислоты.
Гематологические и биохимические анализы показали умеренный лейкоцитоз с атипичными лимфоцитами и лимфопению (возможно, вторичную по отношению к истощению лимфоцитов CD4), умеренную анемию и тромбоцитопению в одном случае заболевания. Значение показателя эозинофилов, превысившего 3000 / мкл, было также замечено в двух случаях болезни. Сильное повышение общего количества белых клеток крови в двух случаях заболевания согласуется с инфекцией. Гистологическое исследование кожи показало повышенную васкуляризацию, в основном, внешнего и среднего слоя дермы (рисунок 6). Не было найдено никаких незаурядных поражений в других исследуемых органах.
Не было выявлено митоксинов на обнаруживаемых уровнях в корме для беременных и лактирующих свиноматок
Рисунок 6. Гистопатологическое исследование кожи: повышенная васкуляризация главным образом внешнего и среднего слоя дермы.
Предпринятые меры
В мае 2014 года в отношении всех свиноматок в день отъёма было предпринято лечение против инфекции репродуктивной системы кишечной палочкой и разновидностью стрептококков, что включало инъекции амоксициллина с клавулановой кислотой, в то время как в 1-ю неделю размещения свиноматок / ремонтных свинок в групповом станке им вводили в корм 400 м.д. амоксициллина. Кроме того, всех заболевших свиноматок подвергали поверхностной обработке порошком ацетилсалициловой кислоты в течение 3 дней. Наконец, чтобы уменьшить агрессию среди свиноматок, был локально использован серийно выпускаемый продукт (на основе трав) с горьким вкусом на коже вокруг шеи и верхней части спины.
В августе 2014 года вакцинация против вируса свиного гриппа и гемофилюс парасуис была включена в программу плановой вакцинации свиноматок / ремонтных свинок, и против актинобациллярной плевропневмонии – в плановую вакцинацию ремонтных свинок. Через два месяца после начала вакцинации, клинические признаки (полиморфная эритема, респираторные признаки и т.д.) резко сократилось.
Развитие случая болезни / Выводы
Стресс ухудшает иммунные функции, поэтому инфекции с большей степенью вероятности поражают свиней в стрессовых условиях содержания в групповых системах. Кроме того, стресс может являться причиной активизации субклинической инфекции. В настоящем клиническом случае вполне возможно, что оплодотворённые свиноматки / ремонтные свинки подвергались «стрессу» в то время, когда их иммунный статус был низким, что делает их более чувствительными к инфицированию и развитию болезни. Известно, что скученность и давка могут вызывать стресс, негативно влияя на иммунную функцию. Так как ПЭ, являясь реакцией гиперчувствительности, обычно вызывается инфекциями или болезнями, то возможным объяснением клинического проявления ПЭ в этом исследовании может быть лихорадка (из-за инфекций свиного стрептококка, гемофилюс парасуис и актинобациллярной плевропневмонии) и, возможно, стресс (из - за скученности и борьбы). Возможность включения инфекции свиного гриппа в этиологию является низкой, поскольку она не переносится на другие свиноматки и обычно она должна появляться у свиноматок после их совместного размещения в групповых станках.
Сегодня после первоначального контроля клинических признаков и применения вторичной вакцинации против вируса свиного гриппа и гемофилюс парасуис, мы обычно замечаем спорадические и крайне низкие случаи болезни по количеству и тяжести симптомов. Эти спорадические случаи болезни в основном остались у ремонтных свинок, после искусственного осеменения и совместного размещения в группах (> 30-35-ый день беременности). Процедура лечения включает инъекционный амоксициллин с клавулановой кислотой и мелоксикам два раза в течение 48 ч. Как вариант, предлагается инъекционный амоксициллин с клавулановой кислотой два раза в течение 48 ч и поверхностная обработка порошком ацетилсалициловой кислоты в течение 3 дней.
В заключение, стресс в условиях размещения в групповых станках может быть инициирующим фактором в отношении данного клинического случая, так как кажется, что была активизирована субклиническая инфекция или взаимодействие различных возбудителей респираторных заболеваний, что негативно отражается на состоянии здоровья и производительности племенного скота.