Оценка возможных вариантов использования капсулированного (включенного в желатиновую капсулу) семени для искусственного осеменения (ИО) свиноматок проводилась путем сравнения того, как на различных этапах этого процесса ведут себя капсулированные (К) и некапсулированные (НК) спермодозы, полученные из эякулята. (Sánchez-Sánchez и др., 2014).
На начальном этапе исследования сравнивалось, как дозы, относящиеся к обеим группам, переносят хранение в течение пяти дней, будучи охлажденными до 150С. Сравнение параметров семени не показало каких-либо заметных отличий.
Одним из самых интересных свойств капсулированного семени является постепенное высвобождение его клеток из капсулы. Для оценки этого процесса in vitro образцы семени обеих групп (К и НК) были подвергнуты процедуре модифицированного всплывания, при этом производилась оценка концентраций сперматозоидов, достигших верхней части контейнера, в котором указанные образцы на протяжении 7 часов подвергались культивации при температуре 370С. Уже в первые часы культивации была отмечена более высокая концентрация сперматозоидов в сперме из НК группы, в то время, как в группе К сперматозоидов практически не было заметно вовсе. Группа НК демонстрирует высокую концентрацию сперматозоидов, которая затем резко падает, после чего сохраняет относительную стабильность, но в следующие 3 часа опять заметно снижается. В то же время, в группе К начинается повышение концентрации, хотя и заметно более умеренное, которое достигает пика (не такого выраженного, как в группе НК), вслед за чем отмечается стабилизация и более высокая, в сравнении с некапсулированным семенем, концентрация в течение последних 3-х часов.
Для того, чтобы изучить поведение капсулированных спермадоз в половых путях свиноматки, был синхронизированы эструсы 6 свиноматок, объединенных в группу. Спермадозы для их осеменения были приготовлены из одного эякулята, обработанного таким образом, чтобы получить порции К и НК семени объемом 95 мл с концентрацией 3 х 109 сперматозоидов каждая. Одни свиноматки были подвергнуты двукратному осеменению дозами НК, а другие – однократному (проведенному одновременно со вторым осеменением свиноматок первой группы) дозой К. Через 8 часов все они были подвергнуты забою и была проведена оценка распределения сперматозоидов в их половых путях (Рис.1).
Рис.1. – Наличие спермы в половых путях свиноматок
Осеменение некапсулированными (НК) дозами 2 осеменения на свиноматку |
Осеменение капсулированными (К) дозами 1 осеменение на свиноматку |
||
Левая сторона | Правая сторона | Левая сторона | Правая сторона |
Тип ИО | К-во ИО/св-м. | Группа | n | % супоросности | Размер помета | |
Ферма 1 | Традиционное ИО | 2 | НК | 9 | 77.78 | 13.57 ± 2.64 |
2 | К | 10 | 90.00 | 14.89 ± 2.26 | ||
Внутриматочное ИО | 2 | НК | 10 | 100.00 | 12.90 ± 1.91 | |
2 | К | 7 | 85.71 | 13.17 ± 1.76 | ||
Ферма 2 | Внутриматочное ИО | 2 | НК | 64 | 85.94 | 11.63 ± 0.33 |
2 | К | 39 | 76.92 | 12.31 ± 0.47 | ||
Ферма 3 | Традиционное ИО P=0.056 |
2 | НК | 34 | 94.12 | 14.15a ± 0.61 |
1 | К | 40 | 82.50 | 12.48b ± 0.60 | ||
Ферма 4 | Внутриматочное ИО | 2 | НК | 16 | 87.50 | 13.36 ± 0.80 |
1 | К | 16 | 81.25 | 12.38 ± 0.73 | ||
2 | К | 16 | 81.25 | 13.46 ± 0.83 |
На Ферме 2 практиковалось только внутриматочное осеменение – по 2 спермадозы на свиноматку. В группе свиноматок, осеменявшихся капсулированным семенем, наблюдались увеличение помета и снижение процента супоросности.
На Ферме 3 осеменение проводилось традиционным способом, при этом, оно было двукратным если использовалось некапсулированное семя, и однократным – если капсулированное. Оба репродуктивных параметра после однократного осеменения капсулированным семенем оказались ниже.
На Ферме 4 проводили внутриматочное осеменение. Группа свиноматок, осеменявшихся капсулированным семенем, была поделена надвое, в зависимости от числа осеменений (одно или два), приходившихся на каждую свиноматку. У свиноматок, осемененных некапсулированным семенем, вырос процент супоросности, а у тех, что были подвергнуты однократному осеменению капсулированным семенем, уменьшился размер помета.
Выводы
Капсулирование семени предлагается к использованию в качестве нового метода, позволяющего улучшить протекание различных процессов, связанных с искусственным осеменением. Тесты, проведенные in vitro, не показали существенной разницы в параметрах семени при их оценке в период хранения образцов, охлажденных до 150С. Более того, разработанная система позволяет осуществлять медленное и постепенное высвобождение сперматозоидов из матрицы капсулы при температуре 380С.
Во время тестов in vivo, концентрация сперматозоидов в половых путях свиноматок, однократно осемененных капсулированным семенем, была более высокой, чем у свиноматок, двукратно осемененных некапсулированным семенем. В результате осеменений, проведенных на нескольких разных фермах, репродуктивные показатели тех свиноматок, что подверглись однократному осеменению капсулированным семенем, были хуже, чем тех, что осеменялись некапсулированными спермадозами двукратно.
Тем не менее, в группах, в которых выполнялось по два осеменения на эструс, на всех фермах размер помета всех свиноматок, осемененных капсулированным семенем, был больше.